哪些生物试剂需要避光储存?

哪些生物试剂需要避光储存?

在生物实验中，许多试剂因具有光敏性(对光敏感，易因光照发生分解、氧化或活性丧失)而需要避光储存。以下是常见的需要避光储存的生物试剂及分类说明：

一、荧光类试剂

荧光基团易受紫外线或可见光激发而发生淬灭(荧光强度减弱或消失)，或因光照发生化学结构破坏，需严格避光保存。

常见试剂：

荧光染料：如 SYBR Green(核酸染色)、FITC(异硫氰酸荧光素)、Alexa Fluor 系列、Cy3/Cy5 等荧光标记物。

荧光探针：用于细胞成像的钙离子探针(如 Fluo-3)、膜电位探针(如 DiBAC4 (3))。

荧光标记抗体 / 蛋白：用于免疫荧光实验的荧光偶联抗体(如 Alexa Fluor 488 标记抗体)。

储存要求：

用棕色试剂瓶或铝箔包裹容器，储存于4℃~-20℃暗处，避免直接暴露于实验室光源(尤其是紫外灯)。

二、核酸与基因操作相关试剂

部分核酸分子或酶试剂在光照下易发生结构损伤或活性下降。

常见试剂：

核酸(DNA/RNA)样品：长期储存的基因组 DNA、RNA 样本(尤其是 RNA 易被光催化氧化降解)。

限制性内切酶：部分酶(如 EcoRI、HindIII)对光敏感，光照可能导致酶构象改变或辅因子(如 Mg²⁺)解离。

逆转录酶 / PCR 酶：如 M-MLV 逆转录酶、Taq DNA 聚合酶，光照可能影响其热稳定性或催化活性。

储存要求：

核酸样品需溶于TE 缓冲液(含 EDTA 螯合金属离子)或超纯水，储存在-20℃或 - 80℃避光环境;酶类试剂需分装于避光管中，避免反复冻融。

三、氧化还原敏感型试剂

光照可能加速氧化还原反应，导致试剂失效或产生有毒副产物。

常见试剂：

抗氧化剂：如 DTT(二硫苏糖醇)、β- 巯基乙醇(维持蛋白巯基活性，光照易被氧化失效)。

维生素类试剂：如维生素 C(抗坏血酸，易氧化变黄)、维生素 B12(光解产生氰化物)。

含亚铁离子的溶液：如 FeSO₄(光照加速 Fe²⁺氧化为 Fe³⁺)。

储存要求：

用棕色瓶或遮光容器储存，置于阴凉暗处(室温或 4℃)，必要时可添加稳定剂(如 DTT 溶液中加入少量 EDTA 抑制金属离子催化氧化)。

四、染色与显色试剂

染色过程中或储存时的光照会导致试剂分解，影响实验结果的准确性。

常见试剂：

银染试剂：硝酸银溶液(光照易分解为银单质，产生黑色沉淀)。

考马斯亮蓝染色液：长期光照可能导致染料结构改变，影响与蛋白质的结合能力。

DAB 显色液(二氨基联苯胺，用于免疫组化)：光照下易氧化产生背景色，需现配现用并避光操作。

储存要求：

固体试剂避光密封保存于室温;液体试剂用棕色瓶储存于4℃冰箱，使用时避免强光照射(如在通风橱中用遮光布覆盖容器)。

五、光敏性药物与生物活性分子

部分天然产物或合成药物因结构中含光敏基团(如双键、芳香环)，光照下易发生降解或产生毒性。

常见试剂：

抗生素：如四环素类(光照下生成有毒降解产物)、氨苄青霉素(长期光照效价降低)。

激素与细胞因子：如吲哚乙酸(IAA，植物生长素，光照易分解)、某些细胞信号分子(如 NO 供体硝普钠)。

光引发剂：如用于细胞光交联实验的 Lucifer Yellow(光照下自发交联失效)。

储存要求：

储存于不透光的西林瓶或铝箔袋中，按说明书要求置于低温(如 - 20℃)或室温暗处，避免与光源接触。

六、其他特殊试剂

同位素标记试剂：如 ³H、¹⁴C 标记的化合物(光照可能加速同位素衰变或引发辐射分解)，需用铅盒避光储存并做好辐射防护。

生物样本(如组织切片、细胞爬片)：染色后的样本(尤其是荧光染色)需用抗荧光淬灭封片剂封片，并避光保存于 4℃，避免长时间拍照或显微镜强光照射。

避光储存的操作建议

容器选择：优先使用棕色玻璃瓶或聚丙烯避光管(如琥珀色 EP 管)，透明容器可用铝箔或黑色遮光纸包裹。

环境控制：

实验室冰箱避免放置于窗边或强光直射区域;

操作时使用红色安全灯(如荧光实验中)或降低室内光照强度。

标签管理：在试剂瓶外标注 “避光(Light Sensitive)” 字样，提醒使用者注意。

现配现用：对光极敏感的试剂(如某些荧光探针)尽量临用前配制，避免储存过程中失效。

总结

判断试剂是否需要避光储存的核心依据是试剂说明书中的储存条件(通常标注为 “遮光”“避光” 或 “Protect from light”)。若说明书未明确说明，可根据试剂类型(如含荧光基团、易氧化结构)推断。严格遵守避光要求可最大限度保留试剂活性，避免因光照导致实验数据偏差或试剂浪费。