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根据培养液的成分特性(如是否含热敏性物质),需选择不同的消毒方式,核心目标是 “杀灭所有微生物,同时保留培养液的营养活性”:
微生物污染:培养液中的葡萄糖、氨基酸等营养成分会成为细菌、真菌的 “培养基”,使其快速繁殖。例如,细菌污染会导致培养液浑浊、pH 值急剧下降(培养基变黄);真菌污染会出现肉眼可见的菌丝或菌落,最终导致细胞大量死亡。
若无法确定最优培养液(如新型细胞系、特殊实验),可通过 “小批量预实验” 验证,步骤如下:
在确定大方向后,需关注培养液的细节参数,避免因 “小差异” 导致实验失败。
包括外观颜色、粉末细度须均匀,溶解性良好,pH 值符合要求,水分含量控制得当,冰点渗透压在合适范围,菌落总数符合标准,通过细胞生长试验检查是否有促生长能力及是否含毒素,控制细菌内毒素等,以确保培养液的质量和性能。
无机盐:钠、钾、镁、钙、磷等基本无机离子,帮助细胞维持渗透压平衡,调节细胞膜功能等,如 Na⁺对维持渗透压恒定有决定性作用,Ca²⁺参与细胞的传导、肌肉收缩等生理活动。
细胞培养液主要用于支持细胞生长和维持细胞的正常生理功能,为细胞提供营养物质、调节渗透压和 pH 值等,是细胞培养中不可或缺的物质基础,
DMEM 培养液:在 MEM 培养液基础上改良,含有相当于初始 Eagle 最低必需培养液 4 倍浓度的氨基酸和维生素,广泛用于哺乳动物细胞培养,如 HeLa、293 等细胞系。
判断实验室资质与生物试剂的适配性,核心是让实验室的 “安全等级、设施能力、备案资质” 与试剂的 “风险等级、使用要求” 完全匹配,避免因 “实验室能力不足” 导致试剂安全风险失控,具体可通过 3 个关键步骤核查:
索要并核查 CoA 报告:每批次试剂的 CoA 是质量的 “直接证明”,需重点核对纯度、活性、杂质含量是否符合实验需求(如临床用试剂需 CoA 与注册标准一致)。