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培养细胞时，培养液必须进行严格的消毒处理，这是细胞培养成功的核心前提之一。细胞(尤其是哺乳动物细胞)对环境极其敏感，未消毒的培养液中会携带细菌、真菌、支原体、病毒等微生物，这些微生物会与细胞竞争营养物质、释放有毒代谢产物，最终导致细胞污染、死亡或实验失败。
用 75% 酒精擦拭污染培养瓶外壁，快速转移至生物安全柜(或单独的无菌操作区)，远离未污染细胞、试剂(尤其是培养液、血清等易被污染的耗材)，瓶身标注 “细菌污染待处理”，避免他人误操作。
监测细胞培养液是否被细菌污染，需结合 “直观观察→显微镜检查→精准检测” 的递进式流程，覆盖从早期隐性污染到显性污染的全阶段，确保及时发现、避免漏判。以下是分层次的具体监测方法，可根据实验室条件和污染怀疑程度选择：
源头把控：杜绝试剂与耗材携带细菌(最关键)，细菌污染常源于 “试剂 / 耗材本身带菌” 或 “储存不当滋生细菌”，需从源头切断风险：
细胞培养液被细菌污染后，通常会在外观、气味、细胞状态及显微镜观察等方面呈现出一系列特征，具体如下：
全程无菌操作，避免二次污染 所有操作(换液、传代、配培养基)均需在超净台内进行，操作前用 75% 酒精消毒双手、台面、培养瓶外壁; 使用一次性无菌枪头、离心管，避免交叉污染;污染细胞与未污染细胞需在不同超净台操作(或间隔 2 小时以上，期间彻底消毒超净台)
细胞培养液被细菌污染后，挽救的核心目标是快速清除细菌、减少对细胞的损伤，但需明确：仅建议对珍贵细胞（如原代细胞、基因编辑细胞） 尝试挽救，常规细胞系(如 HeLa、HEK293)污染后建议直接丢弃(挽救成本高于重新复苏，且易导致污染扩散)。以下是分场景的具体挽
利用显微镜检查(精准识别污染类型)判断细胞培养液是否污染：宏观观察可疑后，必须通过光学显微镜(40×、100×、400× 物镜)进一步确认污染类型，这是判断的核心步骤。
预防细胞培养液污染的核心是建立 “全流程无菌管理” 体系，从试剂准备、操作规范到环境维护，每个环节都需严格控制微生物引入风险。以下是覆盖 “试剂、操作、环境、监测” 四大维度的具体预防措施，可最大程度降低污染概率：
细胞培养液污染是细胞培养中常见问题，一旦发生需快速判断污染类型、及时处理，避免污染扩散至其他细胞或培养环境。处理核心原则是：优先保护未污染细胞和环境，再根据污染程度决定是否挽救受污染细胞(多数严重污染建议直接丢弃，避免浪费资源)。以下是具体处理方法：
