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​操作阶段:减少光照暴露

作者: 发布日期:2025-06-09 22:06:45 来源: 浏览量:0



操作阶段:减少光照暴露

1. 实验室光源管理

光源类型

避免使用紫外灯(如凝胶成像仪)直接照射试剂,实验区域改用白炽灯或黄色滤光 LED 灯(波长>500 nm,可减少蓝光和紫外光干扰)。

应用场景:荧光染色(如 DAPI 染核)时,操作台上方覆盖黄色亚克力板,可使荧光淬灭速率降低 50%。

光照时间控制

荧光标记、酶反应等敏感操作尽量在暗室或遮光罩(如黑色亚克力板搭建的小室)内完成;

例:流式细胞术样本制备时,从染色到上机检测控制在 30 分钟内,且用锡箔纸包裹试管。

2. 快速操作与分装策略

按需分装

将大包装试剂(如 100 mL 荧光抗体)分装为小体积(1~5 mL),避免频繁开启母液瓶导致光照累积暴露;

优势:分装后单次使用的小瓶可直接丢弃,减少母液污染和光照风险。

工具优化

使用黑色吸头盒或铝箔包裹的 EP 管架,避免移液过程中试剂管直接暴露于光源;

例:配制 PCR 反应体系时,将反应管置于黑色冰盒中,减少移液期间的光照影响。

3. 特殊技术手段

化学稳定剂

对易光解的试剂添加抗氧化剂(如维生素 E、叠氮化钠)或淬灭剂(如对苯二酚),抑制光氧化反应;

案例:在 RNA 保存液中加入 0.1% 叠氮化钠,可延缓光照引起的 RNA 降解,使样本在室温避光下稳定保存 7 天。

光屏蔽剂

向溶液中添加遮光剂(如二氧化钛纳米颗粒),通过物理遮挡减少光能吸收;

注意:需验证遮光剂与试剂的兼容性,避免引入杂质干扰实验。





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