细胞培养液培养细胞不贴壁的原因

细胞培养液培养细胞不贴壁的原因

培养细胞不贴壁：原因可能有胰蛋白酶消化过度、支原体污染、培养瓶瓶底不干净、培养液 pH 值过碱、消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当、细胞老化、接种细胞起始浓度太低或太高。可缩短胰蛋白酶消化时间或降低其浓度;检测并清除支原体;清洁或更换培养瓶;调整 pH 值;重新配置消化液或培养液;启用新的保种细胞;调节接种细胞浓度。

悬浮细胞成簇：可能是培养液中含钙、镁离子，存在支原体污染，蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放 DNA 或有 DNA 污染。若有支原体污染，需丢弃培养物;也可用 DNase I 处理细胞。