细胞培养液受到支原体污染时有哪些具体表现?

细胞培养液受到支原体污染时有哪些具体表现?

细胞培养液受到支原体污染时，可通过细胞生长状态、培养液性质变化等方面表现出来，具体如下：

细胞生长异常：支原体污染会抑制细胞生长，导致细胞增殖速度显著下降，如贴壁细胞密度长期不增加，或原本生长良好的细胞出现生长缓慢的情况。细胞形态也可能发生改变，如成纤维细胞可能会变圆、颗粒增多，细胞边缘变得模糊，还可能出现细胞破碎较多的现象。

培养基 pH 变化：支原体代谢会改变培养基的酸碱度，使 pH 值出现异常波动。由于部分支原体降解糖类产生酸性物质，可能导致培养基 pH 值降低，加了酚红的培养基会由红变黄，且可能需要频繁更换新鲜培养基才能维持细胞生存。

培养基轻微浑浊：支原体污染一般不会使培养基明显浑浊，但在污染晚期，可能会出现轻微浑浊现象，不过此表现易与细菌污染混淆，需结合其他特征综合判断。

对抗生素不敏感：若细胞培养液受到支原体污染，使用常规抗生素(如青霉素、链霉素)处理后，无法改善细胞的生长状态和上述异常表现。

荧光染色可见特异性荧光：利用荧光染料(如 Hoechst 33258)染色，由于支原体 DNA 中 A-T 含量占多数，荧光染料会结合到支原体 DNA 上。在荧光显微镜下，可观察到细胞核外有蓝色荧光颗粒，这些颗粒即为支原体 DNA，可作为支原体污染的证据。