常用的培养液消毒方法

常用的培养液消毒方法

根据培养液的成分特性(如是否含热敏性物质)，需选择不同的消毒方式，核心目标是 “杀灭所有微生物，同时保留培养液的营养活性”：

一、过滤除菌    

原理：通过 0.22μm 或 0.1μm 孔径的滤膜，物理性截留细菌、真菌、支原体等微生物(0.22μm 滤膜可截留绝大多数微生物，0.1μm 滤膜可进一步确保支原体去除)    

适用场景 ：含热敏性成分的培养液(如添加了血清、抗生素、生长因子的完全培养液，或氨基酸、维生素等不耐高温的成分)   

优点:不破坏热敏成分的活性，操作相对简便   

注意事项：1. 滤膜需提前灭菌(如高压蒸汽); 2. 过滤前需先去除培养液中的颗粒物(避免滤膜堵塞); 3. 操作需在无菌超净台内进行，防止过滤后二次污染

二、高压蒸汽灭菌   

 原理：在 121℃、103.4kPa(1.05kg/cm²)压力下，持续 15-30 分钟，通过高温高压杀灭所有微生物(包括芽孢)    

适用场景：无热敏性的基础培养液成分(如单纯的葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液 PBS、不含血清的基础培养基干粉溶解后)     

优点：消毒彻底，成本低，适用于大量制备 

注意事项：1. 含血清、酶(如胰蛋白酶)、生长因子的培养液绝对不能用，会导致成分变性失活;   2. 需注意灭菌容器的密封性，避免灭菌后污染

三、射线灭菌    

原理：利用 γ 射线或紫外线的电离辐射作用破坏微生物的 DNA，实现灭菌    

适用场景：少量培养液的表面消毒(紫外线)或大规模商业化培养液的终端灭菌(γ 射线)    

优点：无化学残留，适用于对热、过滤敏感的特殊培养液    

注意事项：1. 紫外线穿透力弱，仅能消毒表面，无法用于培养液内部灭菌;   2. γ 射线灭菌需专业设备，实验室常规操作中较少使用