从源头把控预防细胞培养液被细菌污染

从源头把控预防细胞培养液被细菌污染

源头把控：杜绝试剂与耗材携带细菌(最关键)，细菌污染常源于 “试剂 / 耗材本身带菌” 或 “储存不当滋生细菌”，需从源头切断风险：

1、选择无菌合格的试剂

培养液(基础培养基、血清)、添加剂(胰酶、生长因子)优先选择无细菌、无支原体认证的品牌(要求供应商提供 COA 质检报告，明确标注 “细菌 / 真菌阴性”)，避免使用分装不明、过期或包装破损的试剂。

血清是高风险载体(易携带环境细菌)：优先购买 “热灭活血清”(56℃水浴 30 分钟，破坏细菌活性和补体);若使用未灭活血清，需在使用前取 10mL 样本于培养瓶中，37℃培养 3 天，确认无浑浊 / 菌落后方可使用。

无菌水 / 缓冲液(如 PBS)：需用超纯水配制，经 0.22μm 滤膜过滤除菌(滤膜可截留绝大多数细菌)，配制后 4℃保存不超过 2 周，避免反复开封。

2、确保耗材无菌性

一次性耗材(枪头、离心管、培养皿)选择 “无酶无菌” 规格，开封前检查包装是否完好(若有破损，即使未使用也可能污染)，开封后存于无菌超净台或干燥无菌柜中，1 个月内用完。

反复使用的玻璃耗材(如培养瓶)：需先经自来水冲洗→洗洁精浸泡→去离子水冲洗 3 次→121℃高压蒸汽灭菌 30 分钟(灭菌参数需达标，确保芽孢被彻底杀灭)，灭菌后烘干，存于无菌柜，使用前用 75% 酒精擦拭外壁。