病毒专项检测法(血清 / 动物源试剂必检)

病毒专项检测法(血清 / 动物源试剂必检)

细胞培养试剂中的血清、动物源提取物(如胰酶)易携带病毒(如牛病毒性腹泻病毒 BVDV、腺病毒)，需针对性检测，常用方法如下：

1、细胞病变法(CPE 法)

核心原理：病毒感染敏感细胞后，会导致细胞圆缩、脱落、形成空斑等病变。

操作：取试剂接种至指示细胞(如 Vero、MDBK 细胞)，37℃培养 7~14 天，每天观察细胞形态。

判定：无细胞病变为阴性;若出现病变，需进一步鉴定病毒类型。

适用场景：血清、胰酶等动物源试剂的常规病毒筛查。

2、ELISA 法

核心原理：通过抗原 - 抗体特异性结合，检测试剂中是否存在病毒抗原。

操作：将试剂加入包被病毒特异性抗体的酶标板，孵育后加入酶标二抗，显色并读取吸光度值。

判定：吸光度值<临界值(Cut-off)为阴性。

适用场景：批量试剂的病毒抗原筛查，如血清中 BVDV 检测。

3、荧光定量 PCR 法

核心原理：扩增病毒特异性基因(如 BVDV 的 NS3 基因)，定量检测病毒核酸。

优势：灵敏度高、特异性强，可快速检出低浓度病毒，适用于临床用试剂的精准检测。