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免疫PCR检测是什么以及如何进行?
作者: 发布日期:2024-08-28 19:29:48 来源: 浏览量:0
免疫PCR(Immuno PCR,Im-PCR)是一种结合了抗原抗体反应特异性和PCR扩增反应高灵敏度的检测技术,主要用于微量抗原的检测。其基本原理是利用抗原抗体反应的特异性,通过连接分子将特异性抗体与DNA片段结合,然后通过PCR扩增这些DNA片段,从而实现对目标抗原的定量检测。
免疫PCR的基本步骤如下:
抗原-抗体反应:首先,将待测样品中的抗原与特异性抗体(通常为单克隆抗体)进行反应。抗体通过其特异性识别并结合抗原。
连接分子:将与抗体结合的抗原与连接分子(如亲和素)结合。亲和素是一种能够特异性结合生物素的蛋白质,因此,通过亲和素可以将生物素化的DNA片段连接到抗体上。
PCR扩增:利用PCR技术扩增连接了DNA片段的抗体-抗原复合物。PCR扩增过程中,DNA片段被大量复制,从而提高了检测的灵敏度。
电泳鉴定:扩增后的DNA片段通过电泳进行鉴定,根据特异性PCR产物的有无来判断待测抗原的存在。
免疫PCR具有高灵敏度和特异性,特别适用于检测微量抗原。其优势在于结合了ELISA的特异性和PCR的信号放大功能,使其在检测低丰度抗原时表现出色。